无菌化操作制作菌种

李国强

羊肚菌菌种制作全套无菌化操作细则

作者/李国强

羊肚菌菌种成败，七分靠无菌、三分靠管理。所有菌种污染、发黄、长绿霉、长杂菌、菌丝退化、不出菇，归根结底大部分都是无菌操作不到位造成的。羊肚菌属于高端弱抗性食用菌，菌丝娇嫩、抗杂能力弱，对无菌环境要求远高于普通平菇、香菇。

想要培育出纯白、健壮、高活性、高产量的优质菌种，必须严格落实四大无菌标准：培养料无菌、环境无菌、工具无菌、人员操作无菌。现将整套标准化无菌操作流程细则总结如下。

一、培养料彻底灭菌：菌种无菌的第一道防线

培养料带杂菌，是菌种污染最根本、最致命的源头。无论后续操作多标准，料没杀透，百分百会出问题。

第一，原料预处理必须干净。麦粒、谷壳、辅料必须无霉变、无虫蛀、无异味，霉变原料自带海量杂菌孢子，再高压也很难彻底根除。麦粒浸泡、煮制必须熟透、无硬芯，内外湿度一致，保证灭菌通透。

第二，装袋松紧适度。装料过紧，蒸汽穿透力差，料芯灭菌不彻底；装料过松，后期菌丝生长过快、容易老化。标准松紧度为手压有弹性、不塌陷、不僵硬。

第三，高压灭菌必须达标。羊肚菌菌种严禁常压简易灭菌。必须采用高压灭菌锅，121℃恒温保持120分钟以上，保证料体深层、中心位置彻底无菌。灭菌时间不足、温度不够、冷空气未排净，都会造成假灭菌，后期大面积爆发杂菌。

灭菌结束后，必须在洁净环境自然冷却，禁止开门速冷，防止冷空气带菌二次污染料体。冷却至常温后方可进入接种环节，真正实现培养料百分之百无菌化。

二、接种环境无菌化：杜绝空气杂菌污染

空气中漂浮大量霉菌孢子、细菌、灰尘，接种环境不达标，是菌种批量污染的主要原因。

接种室、接种箱必须提前彻底净化。接种前一天全面清扫、冲洗、除尘，保持室内无粉尘、无杂物、无霉点。

接种前两小时进行空间消毒，采用紫外线灯、气雾消毒双向杀菌，封闭密闭消杀，杀灭空气浮游杂菌。接种期间保持门窗紧闭、禁止人员来回走动、禁止空气对流，避免外界带菌空气进入。

接种环境核心标准：无尘、无风、无杂菌、无异味、静态洁净。只有环境达到无菌标准，接种操作才有意义。

三、接种工具全面无菌化：一物带菌、全批报废

所有接触菌种的工具，绝不允许带菌操作，任何一个工具疏漏都会造成整批菌种污染。

接种钩、接种铲、手术刀、剪刀、镊子，全部采用火焰灼烧彻底灭菌。每次取料、每次转接之前，必须反复过火，冷却后方可接触菌种，禁止高温烫死菌丝。

工具使用过程中，每隔三五袋必须重新过火杀菌，禁止反复带菌操作。工具禁止接触台面、衣服、空气灰尘，全程悬空无菌操作。

台面提前擦拭消毒，酒精擦拭、消毒液擦拭双重处理，保证操作台面零杂菌、零粉尘。

四、操作人员全身无菌化：人是最大的杂菌源头

很多菌种厂设备很好、灭菌到位，依然污染严重，问题全部出在操作人员不无菌。

操作人员进入接种室前，必须洗手、消毒、换洁净工作服、戴口罩、戴帽子、戴手套。头发全部包住，口鼻完全遮挡，杜绝人体皮屑、呼吸飞沫、毛发带菌落入菌袋。

双手是最大污染源，必须反复酒精擦拭，指尖、指缝、手背全部消毒到位。操作过程中，手禁止触碰衣服、脸部、头发、台面外壁，一切非无菌区域严禁触碰。

操作动作要轻、稳、快，减少菌袋开口暴露时间，开口时间越短，污染概率越低。

五、全程标准化无菌操作流程要点

第一，所有菌袋开口、接种、封口全部在无菌区域内完成，严禁露天操作、半敞开操作。

第二，母种、原基转接动作规范，不拉扯、不抖落、不悬空长时间暴露空气。

第三，接种完成立即封口、贴标、有序摆放，杜绝敞口放置。

第四，接种后培养室提前消毒、干燥、通风、避光，保持洁净恒温环境，避免二次感染。

第五，培养期间定期排查杂菌，发现单袋污染立即清除隔离，防止交叉传染整棚菌种。

六、总结

羊肚菌菌种制作，无菌就是产量，规范就是效益。

只要做到四点：料灭菌彻底、环境无菌洁净、工具全程过火、人员规范无菌，就能彻底杜绝绿霉、红霉、毛霉、细菌污染，培育出菌丝洁白、浓密、粗壮、菌核饱满、活性极强、下地高产的顶级优质菌种。

绝大多数种植户产量低、不出菇、烂菌、绝收，根本不是土地问题、天气问题，而是前期菌种无菌操作不严、菌种带菌、菌种退化造成的连锁损失。严格落实以上无菌细则，是种植高产羊肚菌的最基础、最关键、最核心的技术根本。