《活化部分凝血活酶时间延长混合血浆纠正试验中国专家共识》解读

唐唐

活化部分凝血活酶时间就是凝血四项中的APTT，APTT混合血浆纠正试验的目的是：初步判断当APTT结果延长时，是由于缺乏凝血因子，还是存在凝血因子抑制物，为下一步确诊试验的选择提供方向。一、什么是混合血浆纠正试验？ 混合血浆纠正试验就是当患者血浆凝固时间不明原因延长时，将患者血浆和正常人血浆按照一定比例混合后，重新检测凝固时间的筛选试验。 一般来说，当所有凝血因子活性水平在50％及以上时，就可确保APTT维持在参考范围内。当缺乏一种或多种内源性凝血因子的患者血浆与正常人血浆（理论上所有凝血因子活性在100％左右）按1：1的比例混合后，理论上混合血浆中凝血因子均应≥50％，APTT检测结果可被纠正至正常；如果不能被纠正，就要考虑患者血浆中是否存在凝血抑制物，如：抗凝药物、凝血因子抑制物、抗磷脂抗体等。 混合血浆纠正试验主要用于APTT(活化部分凝血活酶时间），也可应用于PT(凝血酶原时间)和TT(凝血酶时间)。二、什么时候启动APTT纠正试验？ APTT结果不明原因超出正常对照至少5秒，患者有相关症状、体征或临床医生需要进一步了解APTT延长的原因时，可启动APTT纠正试验。三、APTT纠正试验具体的操作流程1、正常混合血浆的制备⑴优先使用商品化正常血浆。⑵选择至少20份（男女比例1：1）常规试验均正常的血浆混合在一起，除外感染、肿瘤、创伤、术后、妊娠、新生儿、肝炎、自身免疫性疾病的人群标本。血浆混合后再次离心即可得到正常混合血浆。2、操作方法⑴即刻APTT纠正试验①检测患者血浆得到APTT1结果。②检测正常混合血浆得到APTT2结果。③将患者血浆和正常混合血浆1：1混合后即刻检测得到APTT3结果。⑵孵育APTT纠正试验①将患者血浆置于37℃水浴箱准确孵育2小时后立刻检测，得到APTT4结果。②将正常血浆置于37℃水浴箱准确孵育2小时后立刻检测，得到APTT5结果。③将患者血浆和正常混合血浆1：1混合后置于37℃水浴箱，准确孵育2小时后立刻检测，得到APTT6结果。④将孵育2小时后的患者血浆和孵育2小时后的正常混合血浆以1：1混合后立即检测得到APTT7结果。四、APTT纠正试验结果解读⑴APTT 3、APTT6均纠正，提示凝血因子缺乏，不存在抑制物。⑵APTT3纠正、APTT6延长超过相应的临界值，提示存在抑制物且为时间和温度依赖性。⑶APTT3、APTT6均不纠正， APTT6比APTT7延长不超过相应的临界值，提示存在抑制物，但抑制作用不存在时间和温度依赖性；若APTT6比APTT7延长超过相应的临界值，则抑制作用有时间和温度依赖性。⑷APTT4、APTT5、APTT7分别作为APTT1、APTT2、APTT3的平行对照。当后者（即刻纠正试验）比前者（孵育纠正试验）明显延长时，则提示实验过程中有不稳定因素，该孵育试验结果不可信。五、APTT纠正试验的注意事项1、检验前影响因素 做APTT纠正试验之前，应排除肝素污染、抗维生素K治疗、凝血酶抑制剂或溶栓剂的存在等。2、判断APTT纠正试验是否被纠正的常用方法有4种：①将检测结果与正常参考范围进行比较。②循环抗凝物指数也称罗斯纳指数（RI):RI＝（APTT3-APTT2）/APTT1 ×100％通常临界范围为10-15％，低于10％提示凝血因子缺乏，高于15％，提示存在凝血因子抑制物，10-15％为灰区。（应用较多）③百分比纠正法 即：[(APTT1-APTT3)/(APTT1-APTT2)]×100％④其他方法 超过正常混合血浆5秒以内（或延长＜15％）为纠正；超过正常混合血浆5秒以上（或延长＞15％）为不纠正。3、关于混合比例 启动APTT纠正试验时，患者血浆与正常混合血浆的混合比例通常采用1：1，也可以采用4：1或1：4。4、关于狼疮抗凝物（LA) 狼疮抗凝物是一种免疫球蛋白，是抗磷脂抗体的一种，通过结合磷脂复合物，抑制磷脂表面发生的凝血反应而干扰依赖磷脂的凝血反应。通常表现为凝血时间（如APTT)延长，但临床没有出血表现，反而有血栓形成倾向。 如果狼疮抗凝物（LA）滴度较弱，APTT纠正试验稀释了LA的滴度，则很难区别低滴度的LA标本和LA阴性标本，可能导致假阴性结果。5、关于孵育试验 如果APTT纠正试验明确仅用于LA的筛查，患者无出血表现，则无需做孵育试验。6、复杂情况的结果分析 当同时存在多种抑制物或抑制物与凝血因子缺乏同时存在时，需结合患者病史、临床表现和其他凝血检查进行综合分析。 总之，APTT纠正试验对异常APTT的原因提供初始的评价，有助于指导进一步凝血因子或抑制物检测试验的选择，使诊断效率最大化，最终保障检测质量和患者安全。