<p class="ql-block"> HE染色（Hematoxylin and Eosin staining）是最常见的组织切片染色技术之一，用于在显微镜下观察和分析组织或细胞的结构和形态。但染色过程也会出现许多插曲，这些问题足以重视起来！</p> <p class="ql-block">一、切片在脱蜡后出现白色斑点原因:（1）烤(烘)片温度太低，玻片在脱蜡前没有充分烤(烘)干；（2）切片在二甲苯停留时间不足；（3）二甲苯使用过久，造成脱蜡不完全。解决方案：如果玻片是由于没有烤(烘)干，先用无水乙醇处理去除玻片上的水分，然后重新用二甲苯进行脱蜡处理。如果烤(烘)干不足的现象比较严重，可能导致切片脱落，则无法补救。如果白色斑点是由于切片在二甲苯停留时间不足造成，或使用的二甲苯过久，切片则需退回到二甲苯操作步骤，使其停留时间相对长些，或更换二甲苯，进行重新染色。</p> <p class="ql-block">二、细胞核染色太深的原因：苏木素染色时间太长，分色时间过短。解决方法：调整染色和分色时间。</p> <p class="ql-block">三、细胞质过染、分色不足的原因：伊红染色液浓度过高或染色时间过长，75%乙醇和85%乙醇中时间过短。解决方法：降低伊红染色液浓度或缩短染色时间。</p> <p class="ql-block">四、显微镜下见切片内有大量水珠的原因：切片经梯度乙醇处理后没有完全脱水，导致二甲苯透明，中性树胶封固后残留大量水分。解决方案：移去盖玻片，用二甲苯溶解封固剂如中性树胶。将切片置入新鲜的无水乙醇中，待切片重新脱水完全后，用新二甲苯透明，中性树胶封固。所有用于脱水和透明的液体，在使用一定时间以后，应及时更换。</p> <p class="ql-block">五、染液及试剂污染的原因：通常新配置的苏木素染液使用一段时间后可能会出现结晶析出，染色过程中附着在组织上(特别是含有黏液的组织)。解决方案：（1）手工配置苏木素染色在使用前需过滤，同时定期检查染液底部是否有沉淀；（2）即用型染色液严格按照试剂说明书操作和期限使用，注意检查染液底部是否有沉淀。</p> <p class="ql-block">六、细胞核染色暗淡，即苏木素染色太淡原因：(1)切片在苏木素染色液停留时间太短;(2)苏木素染色液过度氧化，失去染色能力，不能再继续使用:(3)分化步骤处理时间过长。如果是骨组织细胞核暗淡，则多数是由于脱钙过度造成。解决方案：切片重新染色。如果组织在固定液固定时间过长，细胞核染色能力将减弱，须增加其在苏木素染色液的时间，或用一些方法增加组织的嗜碱性，以改善细胞核的着色。</p>