生化结果出现负值，什么情况？

唐唐

　　随着全自动生化分析仪的普及，检验工作对仪器的依赖程度越来越高，作为检验师的我们，有没有因为粗心而发出了一个负值结果？如果遇到负值结果，我们该如何应对，给临床提供一份准确的检验报告呢？

一、生化项目检测为什么会出现负值？

生化分析仪的理论基础是朗伯-比尔定律，即吸光度和物质浓度呈线性关系，检测结果是由K值（校准得到的系数）与所测得的吸光度变化的差值相乘得来的。所以，凡是会造成吸光度变化异常的因素都可能造成负值的结果。

大多数生化项目检测试剂为双试剂，即R1和R2，R1试剂成分通常为缓冲液，主要反应是在R2试剂加入后发生的，如果加入R2试剂反应结束的吸光度值，小于加入R1试剂后的吸光度值，那么，吸光度差值为负数，计算后的结果自然就是负值。

二、生化检测出现负值的原因及应对措施

1、仪器因素

包括灯泡老化、反应杯脏、搅拌棒不干净、试剂R1和R2添加错误或位置放反、样本针漏气等，这些情况不常见，不再赘述。

2、样本因素

（1）脂血

脂血样本中乳糜微粒增多，因其具有散光性的特点，可以使入射光产生散射，通常在R1试剂加入后就有较高的吸光度，R2试剂加入后反应结束的吸光度值，还没有R1试剂加入后的吸光度值高，使检测系统检测到反应体系的吸光度变化为负值，从而得出一个负值结果。

应对措施:将标本高速离心后取下清液进行检测。

（2）溶血或黄疸

溶血或黄疸的标本在检测时，也会出现R2试剂加入后反应结束的吸光度值没有R1试剂加入后的吸光度值高，使反应前后吸光度变化为负数，经计算得出一个负值结果。

应对措施:将标本稀释重做即可。

（3）样本量少、血清中有纤维蛋白或气泡。

R1试剂与血清混合后，由于吸样量不足，加入R2试剂后，反应微弱，甚至R2试剂的加入对整个反应体系起到了稀释作用，使得最终反应的吸光度还不如起始时的吸光度值高 ， 经过计算得出一个负值的结果。

应对措施:样本量少或有气泡可以将血清移至样本杯中测试；血清中有纤维蛋白要用竹签将纤维蛋白挑出，重新离心后再进行检测。

3、底物耗尽

如果是速率法或酶类项目出现负值、或结果异常偏低与临床不符时，应考虑底物耗尽。

通俗地说，底物耗尽就是标本中该项目的浓度太高，试剂里的反应底物短时间内被消耗殆尽，使得之后的反应吸光度变化近乎为零，反应曲线为一段较平坦曲线，其斜率不符合实际情况，从而得出一个负值结果。如果怀疑底物耗尽，记得一定要查看反应曲线。常见发生底物耗尽的项目有谷丙转氨酶、谷草转氨酶、α-羟丁酸脱氢酶、同型半胱氨酸等。

应对措施:将标本稀释重做即可。

4、药物干扰

如果输注了维生素C等还原性药物，采用Trinder反应原理设计的项目:尿酸、肌酐、血糖、腺苷脱氨酶等，在反应过程中，还原性物质与色素原物质竞争H2O2，导致色素形成减少，造成测定结果偏低甚至负值。

应对措施:停药后重新采血复查。

5、血清中M蛋白异常升高

当仪器将R1试剂加入含有大量M蛋白的患者血清中，M蛋白与检测试剂中某些抗人抗体反应，发生沉淀引起浊度增加（或M蛋白在R1试剂的强酸性条件下直接发生沉淀），整个反应体系的吸光度骤然升高，并一直持续到R2试剂的加入，使得最终反应的吸光度还不如起始时的吸光度高，从而得出一个负值结果。

措施:使用聚乙二醇去除M蛋白或稀释样本去除干扰。如果采用稀释样本的方法去除干扰，建议用生理盐水稀释。

6、特别强调:总胆红素和直接胆红素是负值出现频率较高的项目。

因为这两个项目反应的吸光度变化太小了，也就几百的吸光度变化，很容易造成负值的结果。

应对措施:将标本稀释重做或重新做试剂空白。

总之，我们在审核检验报告的时候，一定要谨慎小心，逐项确认后方可将报告发出。如果医生或患者把一张有负值结果的报告单放在我们面前，我们该如何面对呢？